汤姆是一只可爱的猫，十分喜爱恶作剧，杰瑞是和汤姆生活在一起的小老鼠，他们在生活中相互为伴，总是打闹。猫和老鼠是现实中的天敌，他们两个在一起总是闹出很多麻烦和笑话，片中的汤姆经常使用狡诈的诡计来对付杰瑞，而杰瑞则时常利用汤姆诡计中的漏洞逃脱他的迫害并给予报复。

《猫和老鼠》的故事情节围绕着一对常见的家猫汤姆和老鼠杰瑞而展开，汤姆有一种强烈的欲望，总是不断努力的去捉同居一室的老鼠杰利，并不断地努力驱赶着这位讨厌的房客。